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如何优化细胞RNA转染实验条件?

dealer 于 2018-5-9 09:05 发表在 [分享] [复制链接]

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可从以下几方面进行优化:
1.纯化RNA
在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。
2.避免RNA酶污染
微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过的物品或暴露在空气中的物品等,此保证实验每个步骤不受RNA酶污染非常重要。
3.健康的细胞培养物和严格的操作确保转染的重复性
通常,健康的细胞转染效率较高。此外,较低的传代数能确保每次实验所用细胞的稳定性。为了优化实验,推荐用50代以下的转染细胞,否则细胞转染效率会随时间明显下降。
4.选择合适的转染试剂
针对RNA制备方法以及靶细胞类型的不同,选择好的转染试剂和优化的操作对RNA实验的成功至关重要。如Entranster-R试剂

点评

宁泽明 海!外直播 t.cn/RxBC0c2 禁闻视频 t.cn/RJAQKcq 这是哪个国家?治国基本靠裸官,反腐基本靠小三,环保基本靠口号,雾霾基本靠风吹,幸福基本靠央视,前途基本靠父母,命运基本靠投胎,科技基本靠引进,冤情基本靠上   发表于 2018-5-11 12:51

共 0 个关于本帖的回复 最后回复于 2018-5-9 09:05

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