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纯化堵柱的问题

大山里的H2O 于 2017-8-8 17:40 发表 [复制链接]

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最近做his蛋白纯化,表达后样本黏度太高了,不易过柱

共 1 个关于本帖的回复 最后回复于 2017-8-10 17:56

挥手elisa 生物秀才 发表于 2017-8-10 17:56:26 | 显示全部楼层

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裂解液粘稠是流不下来的,建议:
①在超声仪上做超声,打断核酸,裂解液会变清亮不粘稠,若是包涵体蛋白,达不到清亮但不会粘稠
②反复冻融,有好转,效果没做超声好
③加入benzonase全能核酸酶,消化样本中的所有核酸,可以降低蛋白黏性,也可以降低背景
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