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pcr 扩增问题

wx_祗_Q649t 于 2017-7-31 19:39 发表在 [求助] [复制链接]

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刚做pcr不久,遇到这个问题不是很理解,扩增曲线看起来像是飘起来一样,尤其是红线内参基因,希望得到大家的解释

pcr扩增

pcr扩增

共 12 个关于本帖的回复 最后回复于 2017-8-4 20:48

abigen 生物秀才 发表于 2017-8-1 15:52:12 | 显示全部楼层

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估计是浓度太大了,也可能有抑制物干扰,需要排除
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wx_心海_jfzFV 生物秀才 发表于 2017-8-4 09:57:42 | 显示全部楼层

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这是荧光定量?
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qingshui2016 生物秀举人 发表于 2017-8-4 10:02:05 | 显示全部楼层
基线不对,把基线范围设定为4-16,应该能解决问题。
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wx_祗_Q649t 生物秀才 发表于 2017-8-4 10:07:21 来自手机 | 显示全部楼层
wx_心海_jfzFV 发表于 2017-8-4 09:57
这是荧光定量?

嗯,是荧光定量
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wx_祗_Q649t 生物秀才 发表于 2017-8-4 10:07:28 来自手机 | 显示全部楼层
wx_心海_jfzFV 发表于 2017-8-4 09:57
这是荧光定量?

嗯,是荧光定量
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wx_祗_Q649t 生物秀才 发表于 2017-8-4 10:10:27 | 显示全部楼层

嗯,荧光定量,看出了什么问题?

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wx_祗_Q649t 生物秀才 发表于 2017-8-4 10:11:08 | 显示全部楼层
abigen 发表于 2017-8-1 15:52
估计是浓度太大了,也可能有抑制物干扰,需要排除

但CT值显示35
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wx_心海_jfzFV 生物秀才 发表于 2017-8-4 20:16:26 | 显示全部楼层
wx_祗_Q649t 发表于 2017-8-4 10:10
嗯,荧光定量,看出了什么问题?

是不是退火温度不是最佳啊
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wx_心海_jfzFV 生物秀才 发表于 2017-8-4 20:18:15 | 显示全部楼层
wx_祗_Q649t 发表于 2017-8-4 10:10
嗯,荧光定量,看出了什么问题?

你可以把红色的那几个跑一下琼脂糖凝胶电泳,看一下带型,也许有点启发
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