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[分享] 关于SDS-PAGE凝胶的一些常见问题及处理方法 [复制链接]

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发表于 2008-6-26 10:41:05 |显示全部楼层
以下都是小弟做胶过程中遇到的问题,希望能给大家带来帮助。
1 胶的凝结不好,例如有花纹特别是浓度高的胶在冬天温度较低的情况下,在分离胶的下部有波浪样的花纹,凝胶不均匀。解决方法:加大TEMED和过硫酸胺的量,使其凝结速度加快。同时洗干净玻璃板,防止有残留的胶干结在玻璃板上。
2 胶不凝,解决方法:温度较低时加大TEMED和过硫酸胺的量,过硫酸胺必须新鲜配制。如若还是不行重新配制一下缓冲溶液。
3 胶易碎,例如浓度较高的胶在染色和脱色过程以及扫描过程中破裂。解决方法:首先在上述过程中一定要动作轻缓,其次在室温较高的情况下可以适当减少TEMED和过硫酸胺的量。
4 电泳完后胶上有很多长条纹的杂带,解决方法:建议电泳缓冲液不要回收利用。配制胶的溶液一定要纯。
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randy + 3
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发表于 2008-6-26 15:58:46 |显示全部楼层

多谢了

很有用,多谢了。

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发表于 2008-6-26 19:39:49 |显示全部楼层

谢谢

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发表于 2008-6-26 20:20:36 |显示全部楼层

谢谢

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发表于 2008-6-26 22:41:13 |显示全部楼层
本人觉得胶不凝最主要的原因还是察看AP是否已失效。

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发表于 2008-7-9 12:28:44 |显示全部楼层

回复 1-楼 的帖子

多谢了!

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发表于 2008-12-25 12:31:19 |显示全部楼层
多谢楼主分享。

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发表于 2009-1-4 19:10:43 |显示全部楼层
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发表于 2009-1-8 10:45:31 |显示全部楼层
冬天胶凝得比较慢,建议放在恒温箱中凝,这样会迅速很多.25~37度

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秀蛋白
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发表于 2009-2-16 21:45:22 |显示全部楼层
谢谢。受益非浅。

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