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如何提高细胞RNA转染效率

dealer 于 2017-9-26 10:54 发表在 [分享] [复制链接]

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1.纯化RNA

在转染前要确认RNA的大小和纯度。为得到高纯度的RNA,推荐用玻璃纤维结合,洗脱或通过15-20%丙烯酰胺胶除去反应中多余的核苷酸,小的寡核苷酸,蛋白和盐离子。注意:化学合成的RNA通常需要跑胶电泳纯化(即PAGE胶纯化)。

2.避免RNA酶污染

微量的RNA酶将导致RNA实验失败。由于实验环境中RNA酶普遍存在,如皮肤,头发,所有徒手接触过的物品或暴露在空气中的物品等,此保证实验每个步骤不受RNA酶污染非常重要。

3.健康的细胞培养物和严格的操作确保转染的重复性

通常,健康的细胞转染效率较高。此外,较低的传代数能确保每次实验所用细胞的稳定性。为了优化实验,推荐用50代以下的转染细胞,否则细胞转染效率会随时间明显下降。

4.选择合适的转染试剂

针对RNA制备方法以及靶细胞类型的不同,选择好的转染试剂和优化的操作对RNA实验的成功至关重要。如engreen的Entranster-R4000试剂,RNA转染专用试剂,纳米材料,高效低毒。


共 0 个关于本帖的回复 最后回复于 2017-9-26 10:54

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